Efeitos do tratamento neonatal com kaempferol sobre o desenvolvimento neuro-músculo-esquelético em modelo de paralisia cerebral experimental

Abstract

A Paralisia Cerebral (PC) é caracterizada por uma lesão cerebral em período crítico de desenvolvimento do sistema nervoso central, e em consequência déficits motores, comportamentais e de aprendizado são observados nos indivíduos acometidos. Dentre as estratégias de intervenção nutricionais ou mesmo farmacológicas que estão sendo estudadas atualmente, os flavonoides, como o Kaempferol tem se destacado por suas propriedades anti-inflamatórias e neuroprotetoras. Nesse contexto, o objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos do tratamento neonatal com kaempferol sobre o desenvolvimento neuro-músculo- esquelético de ratos submetidos à PC. Este estudo foi aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais (no 0058/2018) da Universidade Federal de Pernambuco. Para a composição dos grupos experimentais ratos Wistar machos foram alocados de forma randomizada após o nascimento em quatro grupos de acordo com o modelo de PC ou controle e tratamento neonatal com kaempferol ou veículo, sendo: C = controle – veículo; K = controle – Kaempferol; PC = Paralisia Cerebral – veículo; PCK = Paralisia Cerebral – Kaempferol. O modelo de paralisia cerebral consistiu em anóxia perinatal associada à restrição sensório-motora das patas posteriores durante a infância (P2-P28). O tratamento com Kampeferol (1 mg / kg) foi realizado por via intraperitoneal durante o período neonatal (P2-P21). Na prole foram avaliados a caracterização somática, parâmetros de maturação física, a ontogênese dos reflexos, o desenvolvimento da atividade locomotora, a coordenação motora, a força muscular, e parâmetros cinéticos, temporais e espaciais da marcha. Ao 36o dia de vida pós-natal os animais foram divididos para realização das análises experimentais do cérebro e do músculo esquelético. Após perfusão intracardíaca o encéfalo foi dissecado e submetido aos procedimentos de imuno-histoquímica para análise de proliferação celular no giro denteado do hipocampo, densidade e perfil de micróglias e proliferação de micróglias no giro denteado do hipocampo. Para análises do músculo esquelético os animais foram eutanasiados por decaptação para dissecação dos músculos sóleo. Os músculos foram processados através da técnica de ATPase miofibrilar para tipagem de fibras musculares e para quantificação de proteínas miofibrilares através de western blot. O tratamento neonatal com kaempferol atenuou os déficits sobre o desenvolvimento da atividade locomotora, da maturação das características físicas, da ontogenia dos reflexos e da coordenação motora ratos com PC. Também o tratamento neonatal com kaempferol preveniu o impacto sobre a proliferação de células progenitoras, no aumento do perfil de micróglias ativadas e proliferação microglial no giro denteado do hipocampo em animais com PC. Além disso, observou- se redução dos efeitos deletérios da PC sobre o fenótipo corporal, atenuando também déficits na força muscular e na marcha. Adicionalmente, o tratamento mitigou o impacto sobre o fenótipo muscular ao prevenir a redução da proporção de fibras oxidativas e de medidas histomorfométricas do músculo sóleo em ratos com PC. Os resultados demonstram que o tratamento neonatal com kaempferol atenuou os déficits de desenvolvimento locomotor e da maturação do sistema neuro-músculo-esquelético em ratos submetidos a PC.