Estudo da síntese de invertase e técnicas de extração em cultivo de Saccharomyces cerevisiae

Abstract

Este trabalho de conclusão de curso investigou a produção da enzima invertase pela levedura Saccharomyces cerevisiae e avaliou a eficácia de métodos físicos de extração para a recuperação dessa enzima. O cultivo da S. cerevisiae foi realizado em meios contendo sacarose e melaço de cana-de-açúcar. A presença e a ação da invertase foram determinadas pela quantificação de açúcares redutores através do método colorimétrico do ácido 3,5-dinitrosalicílico (DNS), analisando as concentrações formadas após a hidrólise da sacarose a 50ºC. Os resultados confirmaram a capacidade da S. cerevisiae de produzir invertase ativa, observando-se um aumento na concentração de açúcares redutores no sobrenadante do cultivo após a hidrólise da sacarose, o que indica a presença de enzima extracelular funcional. Contudo, as tentativas de extração da enzima intracelular por métodos mecânicos, como os testes de moinho de bolas com agitador vórtex e o uso de banho ultrassônico, não foram eficazes nas condições testadas. Isso resultou em baixas concentrações de açúcares redutores após a lise celular, divergindo significativamente dos resultados de estudos na literatura que demonstram alta eficiência para esses métodos. Essa ineficácia foi atribuída principalmente à inadequação dos equipamentos de laboratório utilizados e à falta de otimização específica de parâmetros, como o tamanho das pérolas de vidro e a intensidade do tratamento ultrassônico. Assim, embora a produção e a ação da invertase extracelular sejam evidentes, a recuperação eficiente da enzima intracelular permanece como um desafio, exigindo aprimoramentos metodológicos e a investigação de condições e equipamentos mais adequados para aplicações industriais.