Avaliação da atividade antibacteriana e antibiofilme da associação da polimixina B livre com ácido úsnico encapsulado em lipossoma revestido com quitosana frente a bactérias Gram-negativas multirresistentes

Abstract

Infecções bacterianas representam um dos maiores problemas de saúde pública mundial. Foi estimado, que 7,7 milhões de mortes no ano de 2019 foram associadas a infecções bacterianas, em sua maioria causadas por Gram-negativos resistentes. A resistência aos antimicrobianos é estimulada pelo uso indiscriminado de antimicrobianos e é exacerbada por fatores de virulência como o biofilme. Nesse sentido, uma abordagem terapêutica inovadora é necessária e a terapia combinada mostra-se como uma alternativa para o tratamento. A associação da polimixina B (PMB) e do ácido úsnico (AU) é uma alternativa, entretanto o AU possui limitações. Essas limitações podem ser sanadas com sua encapsulação em lipossomas revestidos com quitosana (QUI). Assim, nosso objetivo foi desenvolver, caracterizar e avaliar a atividade antibacteriana e antibiofilme da associação da polimixina B com o ácido úsnico encapsulado em lipossomas revestidos com quitosana frente a cepas de Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii resistentes a PMB. A preparação do lipossoma foi realizada pela hidratação do filme lipídico e a caracterização físico-química através da análise do tamanho de partícula (TP), índice de polidispersão (PDI), potencial zeta (PZ) e pH. Para determinar o teor de AU e a eficiência de encapsulação (EE%) nas formulações foi usada a espectrofotometria. A avaliação da atividade antibacteriana foi realizada utilizando os métodos de microdiluição em caldo e checkerboard e a atividade antibiofilme através do método cristal violeta. O Lipo-AU-Qui teve TP de 136,6±5,1, PDI de 0,465, PZ de +28, pH de 5, teor de 98,9±0,3% e eficiência de encapsulação (%EE) de 99,94±0,1%. A associação Lipo-AU-Qui + PMB apresentou interações positivas, diminuído as CIMs de PMB em 16-128 vezes, e as do Lipo-AU-Qui em 2-4 vezes. Das 10 cepas testadas, 9 produziram biofilme. Dessas, 6 cepas foram escolhidas para avaliar a atividade antibiofilme. A combinação Lipo-AU-Qui + PMB foi capaz de inibir entre 76,25-100% da formação de biofilme, assim mostrando que a combinação é eficiente, potencializa a atividade antibacteriana e antibiofilme, além de reverter resistência.