Padronização e implementação metodológica de Drosophila melanogaster como modelo experimental e aplicabilidade em estudos radioecológicos

Abstract

A Radioecologia constitui uma área da ciência voltada ao estudo dos efeitos das radiações ionizantes (RI) sobre organismos vivos e ecossistemas, sendo fundamental o desenvolvimento de metodologias capazes de detectar alterações genéticas induzidas por agentes ambientais. Nesse contexto, Drosophila melanogaster destaca se como importante organismo modelo devido ao seu curto ciclo de vida, elevada taxa reprodutiva, baixo custo de manutenção e ampla conservação genética com organismos superiores. Além disso, os cromossomos politênicos presentes nas glândulas salivares (GS) de larvas em terceiro estágio de desenvolvimento (L3) representam uma importante ferramenta citogenética para análise cromossômica e estudos de genotoxicidade. Este trabalho teve como objetivo implementar protocolos para o uso de Drosophila melanogaster como modelo experimental no LARCA/UFPE, com foco em futuras aplicações em radioecologia e monitoramento citogenético. Para isso, foram padronizados o meio de cultivo, o tempo de oviposição, os procedimentos de dissecação das larvas L3 e as etapas de fixação e coloração das GS para preparação das lâminas citogenéticas. O cultivo foi realizado em meio alimentar à base de banana, sob condições controladas de temperatura, sendo estabelecido o período de 24 horas para oviposição, com o objetivo de garantir maior homogeneidade no desenvolvimento larval. As glândulas salivares de larvas em estágio wandering foram submetidas à fixação, coloração e técnica de squash para análise microscópica. Os resultados morfométricos demonstraram aumento da largura média das larvas submetidas à padronização experimental, passando de 0,371 mm no grupo controle para 0,512 mm no grupo teste, correspondendo a um incremento aproximado de 38%, indicando melhores condições de desenvolvimento e menor competição intraespecífica. Observou-se ainda que a concentração salina utilizada na solução de dissecação exerceu influência direta sobre a integridade e o espalhamento cromossômico, sendo identificada a salinização excessiva como principal fator limitante nas preparações iniciais. Após o ajuste da solução salina, verificou-se melhora significativa na preservação estrutural dos cromossomos e na visualização das bandas cromossômicas. A análise dos diferentes tempos de exposição ao ácido acético 45% demonstraram que o período de 2 minutos apresentou melhor desempenho quanto à preservação celular, nitidez cromossômica e dispersão homogênea dos cromossomos, enquanto tempos prolongados promoveram degradação estrutural e comprometimento da análise citogenética. A avaliação da reprodutibilidade experimental revelou percentual global de sucesso de 67,5% nas lâminas consideradas adequadas para análise, demonstrando consistência metodológica satisfatória. Dessa forma, conclui-se que as metodologias padronizadas constituem uma ferramenta viável para utilização de Drosophila melanogaster como modelo biológico, contribuindo para estudos citogenéticos, análises genotóxicas e futuras aplicações em radioecologia e monitoramento ambiental.