AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTINEOPLÁSICA, IN SILICO E IN VITRO, DE DERIVADOS TIOSSEMICARBAZONAS EM LINHAGENS DE CARCINOMA HEPATOCELULAR

Abstract

O carcinoma hepatocelular (CHC) é a forma mais comum de câncer hepático, sendo o sexto tipo mais incidente e o terceiro em mortalidade global. O diagnóstico tardio, a resistência às terapias sistêmicas disponíveis e a toxicidade dos tratamentos convencionais evidenciam a necessidade de novos agentes antineoplásicos com maior seletividade. Nesse contexto, os derivados tiossemicarbazonas destacam-se como candidatos promissores por apresentarem potencial de interferir no ciclo celular e induzir morte celular por mecanismos que incluem, possivelmente, a via lisossomal. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar, in vitro e in silico, o potencial antineoplásico de derivados tiossemicarbazonas em linhagens de CHC. Para isso, in vitro, realizou-se triagem de 24 derivados tiossemicarbazonas em dose única, seguida de ensaios em concentrações crescentes nas linhagens HepG2 e Hep3B e em PBMCs para determinação de IC50 e IS, além de análise do ciclo celular e avaliação da produção de superóxido por citometria de fluxo. In silico, os parâmetros físico-químicos e farmacocinéticos foram obtidos pelas plataformas SwissADME e pkCSM, enquanto a predição de alvos moleculares foi realizada pelas plataformas Drug AI, SwissTargetPrediction e SuperPred, com análise de enriquecimento de vias pela plataforma STRING. Na triagem inicial, três derivados (DT-04, DT-08 e DT-10) reduziram a viabilidade celular abaixo de 50% nas duas linhagens tumorais, sendo selecionados para as etapas subsequentes; os demais compostos não demonstraram atividade citotóxica consistente nas duas linhagens avaliadas simultaneamente. Nos ensaios de citotoxicidade, DT-08 apresentou toxicidade sobre PBMCs (IC50 = 19,02±2,48 µM), enquanto DT-04 e DT-10 exibiram IC50 acima de 100 µM nessa população, sendo mantidos para as etapas seguintes. Nas linhagens de CHC, DT-04 e DT-10 demonstraram atividade citotóxica com IC50 variando entre 5,72±2,69 e 11,54±2,18 µM em HepG2 e entre 5,02±1,21 e 5,53±4,09 µM em Hep3B, com IS superiores a 8 em ambas as linhagens, DT-10 alcançou IS de 17,48 em HepG2 e 19,92 em Hep3B, enquanto DT-04 atingiu 8,66 e 18, respectivamente. A análise do ciclo celular revelou acúmulo de células em G2/M exclusivamente em Hep3B, com significância a partir de 24 horas para DT-10 (p < 0,01) e 48 horas para DT-04 (p < 0,05), sem alterações em HepG2 (p > 0,05). A avaliação da produção de superóxido não demonstrou diferença estatisticamente significativa para nenhum dos compostos em ambas as linhagens (p > 0,05). A avaliação de biodisponibilidade oral in silico demonstrou conformidade com as Regras de Lipinski, alta absorção gastrointestinal predita, ausência de interação com a glicoproteína P e baixa permeabilidade na barreira hematoencefálica. A análise de enriquecimento de vias KEGG dos alvos moleculares preditos identificou convergência em torno de hipóteses mecanísticas relacionadas à apoptose, regulação do ciclo celular e inibição de histona deacetilases. Em suma, os resultados sustentam o potencial antineoplásico de DT-04 e DT-10 como candidatos terapêuticos para o CHC, indicando a necessidade de investigações complementares em modelos experimentais mais complexos para validação de sua eficácia e segurança.