Avaliação da influência de RIPK1 e RIPK3 na recuperação imunológica de pessoas vivendo com HIV em terapia antirretroviral

Abstract

O vírus da imunodeficiência humana (HIV) causa infecção crônica com destruição progressiva de linfócitos T CD4+. A terapia antirretroviral (TARV) promove supressão viral (<50 cópias/mL) e favorece a reconstituição imunológica, porém 10–40% das pessoas vivendo com HIV (PVHIV) mantêm baixos níveis de T CD4+, sendo classificadas como não respondedores imunológicos (INR). A morte celular exacerbada contribui para esse balanço negativo de linfócitos, sendo a piroptose e apoptose as vias mais associadas a esse processo. Entretanto, o papel de genes associados ao desvio da apoptose a necroptose, como RIPK1 e RIPK3, ainda não foram explorados na recuperação imune deficente. Assim este estudo teve como objetivo analisar a influência da a expressão de RIPK1 e RIPK3 em PVHIV sob TARV, e sua associação com a recuperação imunológica deficiente, assim como foi analisado os fatores clínicos e laboratoriais desses indivíduos e realizado testes de correlação da expressão gênica dos genes alvo com genes a via extrínseca da apoptose. Foram recrutadas 36 PVHIV em TARV maiores de 18 anos, que tenham sido submetidas a TARV por no mínimo 18 meses, que foram divididos em dois grupos IR (28) e INR (8) a partir da classificação de Cenderello (2015) ademais dados clínicos e laboratoriais foram adquiridos a partir de análise dos prontuários. Após coleta e posterior isolamento de PBMCs foi e sintetizado cDNA, a partir do RNA extraído, para análise de expressão gênica por PCR em tempo real, com sondas para RIPK1, RIPK3 e genes de referência GAPDH, RPLP0 e ACTB. Os dados referente a expressão de FAS, FASLG e CASP3 foram obtidos de bancos de dados oriundos de estudos já publicados do grupo de pesquisa. As análises estatísticas foram realizadas no GraphPad Prism versão 6.1. indivíduos INR apresentaram contagens de CD4+ pré-TARV ( p = 0,0131) e após 18 meses ( p = 0,0008) significativamente menores que os IR. Na expressão gênica, observou-se maior expressão de RIPK3 no grupo INR (p = 0,02; FC = 1,29) sugerindo que o gene influencia a morte celular exacerbada neste grupo enquanto não houve diferença na expressão de RIPK1 entre os grupos de recuperação imunológica. Além disso, houve correlação entre os genes entre RIPK3 e CASP3, indicando que gene pode intensificar vias apoptóticas e favorecer a perda contínua de linfócitos nos INR. Dessa forma, a persistência da baixa contagem de linfócitos pré TARV e após 18 meses de TARV associada ao aumento da expressão de RIPK3 pode contribuir para a destruição exacerbada de linfócitos, por meio da necroptose e apoptose, que pode culminar na recuperação imunológica deficiente observada no grupo INR.