Avaliação do mecanismo de ação do derivado SB200 nas vias apoptóticas em modelos experimentais de câncer de pulmão

Abstract

O câncer de pulmão (CP) é a principal causa de óbito mundialmente, com o tabagismo como principal fator de risco. O tratamento apresenta muitos desafios, como a resistência à quimioterapia e a alta toxicidade. Neste sentido, é necessário estudar moléculas, como os derivados tiofênicos, com suas atividades antitumorais. Este estudo visou entender o mecanismo de ação relacionado às vias apoptóticas do derivado SB200 no CP, por meio de análise da expressão dos genes Bax (pró-apoptótico) e Bcl-2 (anti- apoptótico) em modelos in vitro e in vivo. Para os ensaios in vitro, a linhagem NCI-H1299 foi semeada em placas com densidade de 5x104 células/poço e exposta a concentração do IC50 de 25,87 μM do SB200. Após 24 horas do tratamento, estas foram recolhidas e colocadas em Trizol para extração do RNA. No modelo in vivo, foram utilizadas camundongos fêmeas BALB/c, que receberam três injeções intraperitoneais de 1 mg/g de uretano em dias alternados, por uma semana, para indução dos tumores pulmonares. Após 20 semanas da primeira aplicação, um grupo foi tratado com 20 mg/kg e outro grupo com 40 mg/kg de SB200 por via intraperitoneal, 3 dias na semana por quatro semanas e um grupo controle recebeu 5 mg/kg de cisplatina, intraperitonealmente, 1 vez por semana por três semanas. Após o sacrifício, os pulmões foram colocados no RNAlater e armazenados. Após a extração do RNA, síntese de cDNA e análise da expressão gênica, foi possível observar que, na linhagem, o tratamento com SB200 induziu um aumento na expressão do gene Bax em comparação às células não tratadas (NT), com níveis similares ao controle com DMSO. A cisplatina apresentou alta expressão de Bax. Para o gene Bcl-2, observou-se redução na expressão após o tratamento com SB200 e cisplatina em comparação aos controles NT e DMSO. No modelo in vivo, o SB200 promoveu aumento dose-dependente na expressão do Bax, superando o controle PBS e o uretano. A cisplatina também elevou o Bax de forma significativa. No gene Bcl-2, o uretano causou uma elevação em relação ao PBS e à dose de 20 mg/kg de SB200. A dose mais alta de SB200 e a cisplatina induziram aumento paradoxal de Bcl-2 possivelmente por um mecanismo compensatório das células tumorais. Com isso, esses resultados demonstram que o SB200 possui efeito pró-apoptótico, aumentando Bax e reduzindo Bcl-2 in vitro, enquanto in vivo induz resposta dose-dependente em Bax, com potencial mecanismo compensatório em Bcl-2 em altas doses. Esses achados destacam seu potencial como candidato terapêutico no CP, embora estudos adicionais sejam necessários para entender a complexidade desse mecanismo e explorar sua eficácia.