Desenvolvimento e avaliação farmacológica de scaffolds acridínicos com potencial ação antiparasitária

Abstract

As leishmanioses e a doença de Chagas compreendem doenças parasitárias causada por protozoários de alto impacto em países tropicais e subtropicais. O arsenal terapêutico disponível para o tratamento dessas patologias é reduzido e limitado devido a fatores associados a toxicidade, alto custo e resistência medicamentosa. Diante dessa problemática, os derivados acridínicos se apresentam como potenciais compostos antiparasitários devido a sua estrutura privilegiada responsável pelo desenvolvimento de variados mecanismos de ação quimioterápicos. A partir dessa premissa, esse trabalho envolveu a síntese e avaliação do potencial antiparasitário de duas classes de derivados acridínicos (triazolidínico-acridínico e

espiro-acridínicos). O primeiro capítulo da tese envolveu a síntese do derivado triazolidínico- acridínico (ACW-02) e avaliação frente formas amastigotas e promastigotas de L. amazonensis,

com posterior avaliação da citotoxicidade e estimulação de macrófagos por MTT, citometria de fluxo e microscopia. Os estudos in silico foram desenvolvidos a fim de predizer um possível mecanismo de ação pela interação com os alvos de DNA, TryR, Topo1, CYP51 e CPB de Leishmania sp., por meio do docking molecular, dinâmica molecular e cálculo de MM-PBSA. Os resultados demonstraram uma boa atividade antiamastigota (IC50= 6,57 μg mL-1 ) e não

toxicidade aos macrófagos (CC50 > 256 μg mL-1

), com indícios de possível ação imunomoduladora ao induzir um efeito microbicida em macrófagos infectados. Os resultados obtidos na determinação de citocinas no sobrenadante da cultura demonstram uma diminuição na expressão de IL-10, IL-6, TNF-α e IFN-γ, gerando efeitos contrários entre si que os tornam inconclusivos. Os estudos in silico demonstraram melhor afinidade e estabilidade na formação do complexo do ACW-02 com CPBLa (Fitscore= 50,97, ΔGbind= -103,13 kJ mol-1 ), alvo envolvido na imunorregulação da relação parasita-hospedeiro e possível responsável pela atividade leishmanicida desempenhada pelo derivado ACW-02. O segundo capítulo da tese compreende a síntese de derivados espiro-acridínicos e avaliação da atividade antileishmania e tripanocida. Para tal, os compostos AMTAC-01 e AMTAC-22 foram ressintetizados e, subsequentemente, avaliados. A avaliação in vitro do potencial leishmanicida se deu pelos métodos de mensuração da atividade de β-gal e adição do substrato CPRG frente amastigotas e promastigotas de L. amazonensis e L. infantum, nos quais os derivados apresentaram potente atividade antipromastigota (IC50= 1,3-2,2 μg mL-1

). A determinação do efeito tripanocida in vitro frente formas amastigotas e tripomastigotas de T. cruzi relevou o AMTAC-22 como promissor para tripomastigotas ao apresentar um IC50 (2,9 μg mL-1

) menor que o benzonidazol. Entretanto, esses compostos demonstraram baixo índice de seletividade quando avaliado frente macrófagos, células Vero e L929. Os estudos in silico demonstraram o perfil de druglikeness dos compostos e demonstraram uma afinidade desejável frente aos alvos TryR, CYP51, CPBLa, Topo e TFI por docking molecular, sendo os melhores complexos selecionados para dinâmica molecular, que ressaltou AMTAC01-CPBLa como o complexo mais estável pela avaliação de RSMD, RMSF, Rg e ligações de hidrogênio. Em conclusão, os resultados demonstraram o potencial antiparasitário dos compostos acridínicos investigados, impulsionando a continuidade dos estudos envolvendo esses possíveis candidatos a fármacos a fim de mitigar o efeito tóxico e compreender seus mecanismos de ação.