Investigação da IL-18 e da IL-18BP como Potenciais Alvos Terapêuticos para a Esclerose Sistêmica

Abstract

A esclerose sistêmica (ES) é uma doença autoimune rara do tecido conjuntivo caracterizada por dano vascular, desequilíbrio imunológico e fibrose da pele e de órgãos internos, sendo a doença reumatológica com maior risco de morte. Sua fisiopatologia tem sido relacionada com a ativação de células imunes e a liberação excessiva de mediadores químicos, como as citocinas. A Interleucina-18 (IL-18) é uma citocina pró-inflamatória que apresenta níveis desregulados em amostras de pacientes com ES, a qual possui um antagonista natural, a proteína de ligação à IL-18 (IL-18BP) que atua inativando a ação dessa citocina. Nesse contexto, considerando que até o presente momento não há cura para essa doença, o objetivo deste trabalho é investigar a IL-18 e a IL-18BP como potenciais alvos terapêuticos para a ES. Para isso, foram recrutados 15 pacientes com ES do Ambulatório de Esclerose Sistêmica do Serviço de Reumatologia do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco (HC-UFPE). Foram coletadas amostras de sangue dos pacientes para culturas de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). As PBMCs foram isoladas e estimuladas ou não com IL-18 e/ou IL-18BP em quatro diferentes condições: células sem tratamento (1), células tratadas com IL-18 a 1 ng/ml (2), células tratadas com IL-18BP a 3,12 ng/ml (3) e células tratadas com IL-18 e com IL-18BP simultaneamente (4). Após 48h os sobrenadantes dos cultivos foram centrifugados e armazenados para as posteriores dosagens. As citocinas IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-13, IL-17A, IFN-γ e TNF foram quantificadas nos sobrenadantes das PMBCs por ELISA sanduíche, seguindo as instruções dos fabricantes. Todos os pacientes recrutados foram do sexo feminino, a média de idade foi de 49,4 anos e o subtipo ESlc foi o mais presente na população estudada. As PBMCs estimuladas com IL-18 e com IL-18/IL-18BP, em comparação às células sem estímulos, apresentaram um aumento estatisticamente significativo na expressão de IL-6, sendo p=0.0133 e p=0.0019, respectivamente. As células estimuladas apenas com IL-18BP não expressaram um aumento significativo da IL-6. A secreção das demais citocinas não foi modificada significativamente pelas condições testadas por esse estudo. Os dados epidemiológicos da população de estudo do presente trabalho foram semelhantes àqueles encontrados na literatura. A IL-18 e o conjunto IL-18/IL-18BP promoveram aumento na secreção da IL-6 em PBMCs de pacientes com ES, evidenciando o seu papel fisiopatológico e o seu potencial como alvo terapêutico. Estudos adicionais são necessários para melhor detalhamento dos efeitos da IL-18/IL-18BP na esclerose sistêmica.