Avaliação do potencial terapêutico de derivados de tiossemicarbazonas em células neoplásicas de pulmão

Abstract

O câncer de pulmão (CP) é a principal causa de morte por câncer, e sua gravidade está associada ao diagnóstico tardio, recidiva e resistência aos medicamentos, principalmente à cisplatina. Contudo, diante dos efeitos adversos deste fármaco, torna-se fundamental a busca de novas alternativas terapêuticas. Nesse contexto, outras moléculas que formam complexos com íons metálicos vêm sendo estudadas, sendo as tiossemicarbazonas (TSCs) um exemplo promissor no que se refere à atividade antineoplásica. Dessa forma, o presente estudo objetiva investigar a atividade antineoplásica in vitro de derivados de TSCs (PR-12, PR-14 e PR-17) em linhagens celulares de carcinoma de pulmão de células não pequenas (CPCNP), por meio da avaliação da citotoxicidade e dos efeitos dos derivados no ciclo e morte celular, ativação das caspases efetoras -3 e -7, bem como na geração de espécies reativas de oxigênio (ROS). A citotoxicidade foi analisada por meio do ensaio de MTT em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) e em linhagens de CPCNP (A549 e NCI-H1299). A análise do ciclo celular, a indução de apoptose e necrose, bem como a ativação das caspases e a geração de ROS, foram realizadas por citometria de fluxo, mediante marcação com iodeto de propídeo (PI), PI e anexina V-APC, reagente CelEvent® Caspase 3/7 Green e dihidroetídio, respectivamente. Os derivados de TSCs não apresentaram toxicidade considerável em PBMCs (IC50>100 μM), e foram tóxicos para as células neoplásicas. Na linhagem A549, os valores de IC50 variaram de 1,15 a 22 μM. Já na linhagem NCI-H1299, os derivados apresentaram valores de IC50 entre 7,5 e 12,4 μM. Com relação à análise do ciclo celular na linhagem A549, o PR-12 induziu o acúmulo de células na fase S, e o PR-14 na fase G2/M. Na linhagem NCI-H1299, todos os derivados de TSCs elevaram o porcentual de células na fase S, e os compostos PR-12 e PR-17 também provocaram um aumento na fase G2/M. No que se refere à indução de morte celular na linhagem A549, os derivados PR-12 e PR-14 causaram tanto apoptose quanto necrose. Na linhagem NCI-H1299, todos os derivados induziram apoptose e necrose. Ademais, na linhagem A549, apenas os compostos PR-12 e PR-14 ativaram as caspases -3 e -7, enquanto na linhagem NCI-H1299, todos os compostos ativaram estas proteases. Em relação à geração de ROS, apenas o PR-14 aumentou sua produção na linhagem A549, já na linhagem NCI-H1299, todos os derivados elevaram o nível de ROS. As análises demonstraram que os derivados de TSCs apresentaram atividade antitumoral frente às linhagens neoplásicas de pulmão, indicando que esses compostos podem ser potenciais candidatos a fármaco para o tratamento do CPCNP.