Avaliação in vitro da atividade leishmanicida, citotoxicidade e capacidade imunomoduladora de novas piridinas tiazóis

Abstract

As leishmanioses são doenças negligenciadas causada por diversas espécies de protozoários flagelados do gênero Leishmania. Afetam milhões de pessoas em todo mundo, sendo consideradas um grave problema de saúde pública. O tratamento existente apresenta alta toxicidade, diversos efeitos colaterais e casos de resistência, tornando evidente a necessidade de novas abordagens terapêuticas. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade leishmanicida, a citotoxicidade e a capacidade imunomoduladora de novas piridinas tiazóis. Testes in vitro foram realizados com nove compostos, para investigar a atividade leishmanicida sobre diferentes formas evolutivas promastigotas e amastigotas selvagens e transgênicas de Leishmania amazonensis e Leishmania infantum. A atividade citotóxica foi avaliada sobre esplenócitos murinos, células HepG2 e RAW264.7. O potencial imunomodulador foi avaliado mediante a dosagem da produção de Óxido nítrico (ON) em macrófagos J774 e a dosagem de citocinas em sobrenadantes de culturas de esplenócitos murinos por meio do kit CBA. Sobre a atividade leishmanicida para as formas promastigotas de L. amazonensis e L. infantum, os compostos que apresentaram melhores valores de IC50 para as duas espécies, considerando as cepas selvagens e transgênicas foram, respectivamente: 3a (7.38 μM, 1.01 μM) (8.59 μM), 3g (3.74 μM, 4,54 μM) (7.40 μM, 6.71 μM) e 4e (3.28 μM / 1.67μM) (6.25 μM, 6.80 μM), quando comparado a miltefosina (15,80 μM, 8,42 μM) e (26,44 μM, 38,20 μM). Os compostos não apresentaram inibição de crescimento quando as formas amastigotas foram avaliadas. Foi possível observar que os compostos mostraram ser menos tóxicos frente as células HepG2 em relação a miltefosina, droga de referência. Para as células esplênicas apenas compostos 4h e 4m se destacaram em relação a miltefosina, enquanto para os macrófagos RAW 264.7 apenas o 3a mostrou-se ser menos tóxico. Não foi observada a produção de ON induzido pelos compostos. Quanto a produção de citocinas observou-se a indução de citocinas relacionadas ao perfil Th1 (TNF, IFN-y e IL-6) que desempenham papel importante para resolução da doença. De acordo com os resultados obtidos os compostos 3a, 3g e 4e se destacaram entre os demais como potenciais candidatos a novos fármacos, apresentando atividades leishmanicidas relevantes frente as promastigotas, bons índices de seletividade e pouca toxicidade. Além disso, eles induziram citocinas importantes que compõem um perfil de resposta imunológica Th1, associado ao combate da infecção. Dessa maneira os compostos 3a, 3g e 4e apresentam-se como promissores nos estudos de novas drogas para o tratamento das leishmanioses.