Desenvolvimento do protocolo combinado no CRCN-NE para triagem e estimativa de dose absorvida

Abstract

A biodosimetria baseia-se na investigação dos efeitos biológicos relacionados com a dose absorvida em casos de exposição acidental ou ocupacional à radiação ionizante. Essa investigação é realizada por meio de análises citogenéticas e estudos de alterações cromossômicas, principalmente o ensaio de dicêntrico, que se tornou rotina na estimativa de dose absorvida em exposições acidentais. Por sua vez, o ensaio de micronúcleo por bloqueio da citocinese, por ser uma técnica mais rápida e de fácil análise, resulta em uma alternativa adequada para procedimentos de triagem em situações de urgência. No entanto, os micronúcleos não são específicos para radiação ionizante, variando de acordo com idade, sexo, estilo de vida, entre outros parâmetros. Por esse motivo após a triagem, o ensaio de dicêntrico deverá ser aplicado para estimativas de dose absorvida mais exata, devido a sua alta especificidade para radiação ionizante, o que torna a técnica padrão ouro para dosimetria biológica. Diante disso, este trabalho visa implementar e avaliar um protocolo combinado que englobe as técnicas de micronúcleo e dicêntrico e que permita diferenciar entre as fases do ciclo celular para assim avaliar a dose absorvida em casos de emergências de larga escala. Além disso, visa comparar os resultados obtidos pelas técnicas aplicadas individualmente. Para isto, amostras sanguíneas de um doador foram irradiadas com as doses de 0,5 Gy e 0,75 Gy. As amostras foram expostas à fonte de 60Co (Gammacel 220) localizada no Departamento de Energia Nuclear (DEN/UFPE). As preparações citológicas para as análises das alterações cromossômicas foram obtidas a partir da cultura de linfócitos, tanto para a técnica de dicêntrico e micronúcleo, quanto para o protocolo combinado. Em seguida, as lâminas foram confeccionadas a partir do precipitado de células ressuspenso em solução fixadora e posteriormente foram coradas com Giemsa 5%. As frequências de cromossomos dicêntricos foram estabelecidas a partir da leitura de 533 metáfases para o ensaio de dicêntrico, 588 para o intervalo de 48h e 321 para o intervalo de 72h do protocolo combinado. Para a técnica de micronúcleo foram analisadas 4957 células binucleadas, 185 no intervalo de 48h e 295 no intervalo de 72h do protocolo em estudo. As doses foram estimadas utilizando o coeficiente das curvas de dose-resposta. Os resultados obtidos mostraram que tanto os ensaios de dicêntrico e micronúcleo separadamente, quanto o protocolo combinado, as doses estimadas englobaram a dose absorvida conhecida no intervalo de confiança de 95%. Sendo assim, o protocolo combinado mostra-se um ensaio promissor para a avaliação de dose acidental.