Desenvolvimento e avaliação de modelos metabonômicos para estadiamento de fibrose periportal em pacientes com esquistossomose mansoni usando cromatografia à líquido e quimiometría

Abstract

A esquistossomose é uma das doenças de maior prevalência entre aquelas veiculadas às coleções hídricas, sendo principalmente um risco nas populações de área rurais e das periferias urbanas. No Brasil estima-se que cerca de 1,5 milhões de pessoas vivem em áreas sob o risco de contrair a doença. Portanto a determinação da presença e gravidade da fibrose hepática é essencial em especial para a população de difícil acesso a exames existentes apenas em grande centro. Para contemplar o estadiamento da doença nesta população, estudos estão surgindo na tentativa de desenvolver métodos que sejam capazes de identificar e avaliar a fibrose periportal por meio de marcadores biológicos presentes no sangue. Por essa razão, este trabalho objetivou desenvolver e avaliar modelos metabonômicos para estadiamento de fibrose periportal em pacientes com esquistossomose mansônica usando cromatografia à líquido e quimiometría, tendo a ultrassonografia como padrão de referência. O estudo foi realizado com 94 amostras de soro, sendo 19 de pacientes com o estágio leve da doença, 30 intermediário e 45 avançado. As condições de análise das amostras foram previamente otimizadas. No preparo de amostra foram testados os métodos DLLME e QuEChERS. Já para a fase móvel da análise cromatográfica, foram testados gradientes de acetonitrila e metanol. A otimização revelou que o melhor preparo de amostra foi o DLLME e o melhor gradiente da fase móvel foi o metanol. Com as condições de trabalho definidas foram analisadas as 94 amostras utilizando um HPLC-DAD. Os dados obtidos foram pré-processados, usando o algoritmo Icoshift para correção de deslocamento de pico e posteriormente foram submetidos a análise multivariada exploratória e classificatória através do software MATLAB R2010a. A análise por ROBPCA não indicou a presença de amostras anômalas. Dentre os modelos metabonômicos construídos, o melhor foi o GA-LDA que obteve 84% de sensibilidade, 83% de especificidade e 83% de exatidão para discriminação de pacientes com FPP leve daqueles com FPP avançada. Outro modelo que apresentou bons resultados foi o DD-SIMCA que obteve 92% de sensibilidade, 63% de especificidade e 75% de exatidão. Desta forma o presente trabalho desenvolveu modelos que podem ser utilizados para auxiliar o diagnóstico e controle dinâmico da doença utilizando amostras de soro. O diagnóstico usando marcadores biológicos no sangue possibilita um acompanhamento mais frequente da doença e o monitoramento de pacientes com dificuldade de se deslocar para realizar a ultrassonografia.