Avaliação da atividade leishmanicida do alcalóide milonina frente Leishmania amazonensis e o envolvimento de possíveis mecanismos de ação

Abstract

As doenças tropicais negligenciadas são consideradas como um problema global de Saúde Pública, afetando cerca de um bilhão de pessoas, principalmente em países subdesenvolvidos e dentre essas se destacam as leishmanioses, doença de Chagas e doença do sono. Os tratamentos atuais contra a leishmaniose são limitados devido à toxicidade inaceitável, altos custos e significativa resistência aos medicamentos utilizados. Logo, tem sido crescente a busca por novos fitoterápicos com atividade potencialmente leishmanicida e com baixa toxicidade. A milonina, um alcaloide encontrado na planta Cissampelos sympodialis Eichl. (Menispermaceae), tem sido pouco estuda quanto as suas atividades farmacológicas, independente de outras atividades já referidas na literatura. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a atividade leishmanicida do alcaloide milonina isolado de C. sympodialis Eichl frente Leishmania (L.) amazonensis e o envolvimento de possíveis mecanismos de ação. Avaliou-se a atividade leishmanicida in vitro da milonina frente às formas promastigotas de L. (L.) amazonensis (MHOM/BR/77/LTB0016) e (LV79). Verificou- se a infecção de macrófagos medulares de BALB/c pelos parasitos. Foi investigada a atividade citotóxica desse alcaloide frente às células Vero, macrófagos RAW e macrófagos medulares de BALB/c. A morfologia das células Vero foi observada após o teste de citotoxicidade. Determinou-se a produção de óxido nítrico (NO) e a avaliação do potencial antioxidante pelo método DPPH. A milonina apresentou atividade leishmanicida frente às formas promastigotas da L. (L.) amazonensis das cepas: MHOM/BR/77/LTB0016 (IC50 = 6,71 μM) e LV79 (IC50 = 3,66 μM). A IC50 da milonina (independente da cepa) reduziu, consideravelmente, o crescimento dos parasitos in vitro, em função do tempo de cultivo. A milonina foi citotóxica para as células Vero a partir da concentração de 250 μM e para os macrófagos medulares BALB/c na concentração de 457,5 μM. Alterações morfológicas nas células Vero foram observadas em função de sua toxicidade. Observou-se um aumento de NO pelos macrófagos expostos a milonina e um elevado potencial antioxidante. O presente estudo descreve pela primeira vez a potencial atividade leishmanicida da milonina contra as formas promastigotas de Leishmania (L.) amazonensis e sugere- se que a milonina pode ser utilizada como um promissor protótipo para o desenvolvimento de novos agentes terapêuticos com atividade leishmanicida, sendo necessários mais estudos para elucidar os possíveis mecanismos de ação desse alcaloide.