Imunossensor eletroquímico de nanohíbrido polimérico para detecção do H-FABP, um marcador precoce do infarto agudo do miocárdio

Abstract

O infarto agudo do miocárdio (IAM), representa um importante problema de saúde pública no Brasil e no mundo, apresentando taxa crescente de incidência e mortalidade. Devido a sua relevância e magnitude, métodos analíticos de uso point-of-care vem ganhando destaque a partir do desenvolvimento de imunossensores eficientes, rápidos e práticos. Aqui, um imunossensor eletroquímico foi desenvolvido para detecção do H-FABP, recentemente apontado como um importante marcador da isquemia cardíaca. Para construção da plataforma sensora, eletrodos de carbono vítreo foram modificados através do uso de nanotubos de carbono carboxilados e eletrossíntese do polímero condutor PEDOT:PSS, associado ao aminoácido L-Cisteína (NTC/PEDOT:PSS@Cys). Após eletrossíntese, o eletrodo foi funcionalizado com grupamento carboxílicos adicionando-se ácido oxálico à plataforma sensora. Em seguida, uma mistura de EDA, EDC/NHS e anti-H-FABP foi adicionada para exposição de grupamentos aminas facilitando as ligações amidas dos anticorpos à plataforma sensora. Após imobilização dos anticorpos, os sítios ativos não-reativos do filme foram bloqueados com uma solução dupla de glicina (100mM) em pH 4,0 e pH 8,0. A caracterização do sensor foi realizada utilizando a técnica de voltametria cíclica. O filme de NTC/PEDOT:PSS@Cys/Ác.Oxálico apresentou boa estabilidade quando submetido a sucessivas leituras voltamétricas, não existindo deslocamento significativo dos picos (CV% Ipa e Ipc aproximadamente 0,5% e 0,2%, respectivamente). A resposta analítica em amostras de soro enriquecido foi obtida por voltametria cíclica. O imunossensor exibiu uma faixa linear de 5,0 a 17,5 ng/mL, limite de detecção em 5,6 ng/mL e limite de reação (Cut-off) em 9,62 ng/ml. Apesar de outras plataformas na literatura apresentarem limites de detecção mais baixos, esta mostrou excelente estabilidade com o uso de filmes poliméricos utilizando um composto inovador, o PEDOT:PSS.