Alterações cromossômicas radioinduzidas na identificação de indivíduos heterozigotos para anemia de Fanconi

Abstract

A Anemia de Fanconi (AF) é uma doença resultante de fragilidade cromossômica, associada a falhas no mecanismo de reparo celular, com padrão de herança autossômica recessiva ou ligada ao cromossomo X. Um dos grandes desafios é o seu diagnóstico, uma vez que esta doença rara possui extensa variabilidade fenotípica. Os testes laboratoriais para o fechamento de diagnóstico de AF utilizam agentes clastogênicos, a exemplo do DEB – Diepoxibutano e MMC – Mitomicina C. Entretanto, estes testes não identificam indivíduos heterozigotos para AF. Uma metodologia recentemente proposta, que utiliza a radiação gama em substituição ao DEB ou a MMC (Depósito de patente sob Nº BR10 2013 0256684), poderá ampliar significativamente as possiblidades para diagnóstico laboratorial desta síndrome. Neste contexto, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a viabilidade do teste de fragilidade cromossômica, com a utilização das radiações ionizantes como agente clastogênico, a fim de identificar indivíduos heterozigotos para AF. Para tanto, foram estudados 3 grupos de indivíduos: indivíduos normais (N), pacientes AF positivos e pais desses pacientes, que são heterozigotos para AF (HAF). De cada voluntário, foram coletadas amostras de sangue periférico e separadas em 2 alíquotas, sendo uma irradiada e a outra mantida como controle (não irradiada). Em seguida, foi utilizada a metodologia de quantificação de aberrações cromossômicas instáveis em células linfocitárias, por microscopia óptica de campo claro, a partir de amostras de sangue periférico irradiadas. A análise estatística dos resultados indicou que é possível diferenciar, ao nível de significância de 5%, o grupo N do grupo HAF, após a irradiação das amostras. Comparando-se as análises dos grupos AF e HAF, constatou-se que as frequências de dicêntricos, fragmentos, quebras e falhas cromossômicas apresentaram resultados semelhantes. Todavia, apenas os pacientes AF apresentaram figuras radiais, aspecto este que permitiu diferenciar esses dois grupos (AF e HAF). Os resultados alcançados nesta pesquisa indicam a viabilidade de utilização das radiações ionizantes, como agente clastogênico, em testes laboratoriais para caracterização de indivíduos HAF. O teste de sensibilidade às radiações ionizantes poderia ser empregado em programas preventivos envolvendo grupos de risco (famílias com histórico genealógico e descendentes de casamentos consanguíneos), uma vez que a identificação desses indivíduos (AF,e HAF) contribuiria para um melhor acompanhamento e prevenção de doenças relacionadas a genes mutantes inerentes de pacientes AF, bem como no aconselhamento genético.