Desenvolvimento, caracterização e avaliação das atividades citotóxica e antitumoral de nanocápsulas convencionais e furtivas contendo β- lapachona

Abstract

Este estudo descreve como nanocápsulas convencionais e furtivas foram desenvolvidas e caracterizadas, para viabilizar o carreamento daβ-lapachona para sua utilização na terapêutica do câncer. Primeiramente, aβ-lapachona foi encapsulada em nanocápsulas de Poli-(ɛ)-caprolactona (PCL) e em nanocápsulas do copolímero Poli (ɛ-caprolactona)-polietileno glicol (PCL-PEG), seguindo o método de deposição interfacial do polímero pré-formado. Estas nanocápsulas foram caraterizadas pelo tamanho de partícula, índice de poli dispersão, eficiência de encapsulação e cinética de liberação in vitro. A avaliação da citotoxicidade foi realizada seguindo o método MTT, através de viabilidade celular de linhagem de células de leucemia promielocítica aguda (HL-60), câncer de mama(MCF-7), carcinoma de laringe humana (HEp-2) e carcinoma mucoepidermoide de pulmão humano (NCI-H292). E por fim, a atividade antitumoral in vivo da β-lapachona foi avaliada em camundongos machos Swiss inoculados com células de Sarcoma 180 (S-180),e estes animais receberam doses diárias de20 mg/kg/dia de β-lapachona encapsulado em nanocápsulas furtivas (NC-PCL-PEG/ β-lap) ou β-lapachona (β-lap) em suspensão por 7 dias. Os resultados demonstraram que o método de preparação foi eficiente na formação de nanocápsulas monodispersas (PDI<0,3), com tamanhos compreendidos entre150 e200 nm e com uma eficiência de encapsulação do fármaco de 98 ± 0,91% e 97 ± 1,3% para as nanocápsulas convencionais e furtivas, respectivamente. O perfil da cinética de liberação in vitro evidenciou uma liberação máxima da β-lapachona, através das nanocápsulas, em torno de 62,18 ± 3,93% e 66.29 ± 1,74% para PCL/β-lap ePCL-PEG/β-lap, respectivamente. No estudo de citotoxicidade, aβ-lapachona apresentou um efeito antiproliferativo relevante apenas na linhagem deMCF-7 (IC₅₀0,39μg/mL), onde ficou praticamente igual ao padrão DOX (IC₅₀ 0,32 μg/mL). De maneira geral aβ-lapachona, quando encapsulada, apresentou valores de IC₅₀ maiores que aβ-lapachona livre, com exceção na linhagem NCI-H292, o que provavelmente, deve-se ao fato de um mecanismo de captura celular diferenciado. Dessa forma o ensaio de MTT se mostrou bastante eficiente na avaliação de citotoxicidade da β-lapachona livre e encapsulada em relação ao padrão de análise (DOX). Nos estudos in vivo a atividade antitumoral da β-lapachona nanoencapsulada promoveu uma inibição da massa tumoral acima de 49,29%, quando comparado ao grupo controle, e de aproximadamente 15% quando comparado com o fármaco livre.