Avaliação da Atividade Antineoplásica In Vitro e In Vivo de Extratos Orgânicos de Pseudociphelaria aurata (Liquén)

Abstract

Os metabólitos secundários liquenicos são amplamente descritos na literatura por suas propriedades biológicas, citando-se: antimicrobiana, antinflamatória, indutora de interferon, cicatrizante, antineoplásica e citotóxica, entre outras. O presente estudo descreve a avaliação da atividade antineoplásica in vitro e in vivo dos extratos orgânicos da Pseudociphellaria aurata. O material botânico foi coletado no município de Saloá - PE. Os extratos orgânicos foram obtidos através do método de esgotamento a quente em aparelho de soxlet, seguindo-se a série eluotrópica dos solventes, éter, clorofórmio e acetona. Os extratos foram então rotaevaporados e mantidos em dissecador até peso constante. Foram realizadas análises cromatográficas utilizando-se técnicas em camada delgada (CCD) e líquida de alta eficiência (CLAE). Em seguida, os extratos etéreo e clorofórmico foram utilizados em testes de citotoxicidade, utilizando-se as células HeLa (carcinoma epidermoide do colo uterino) e o método de MTT. Em seguida foram realizados ensaios de toxidez aguda e a determinação da DL50. Por fim, realizou-se a avaliação da atividade antitumoral, utilizando-se os tumores sólidos de Erhlich e Sarcoma 180. Os tecidos tumorais foram ainda submetidos à análise histopatológica utilizando-se a técnica de marcação das regiões organizadoras de nucléolos com prata coloidal (AgNOR). O processo de obtenção dos extratos mostrou-se bastante eficiente, sendo obtidos rendimentos de 3,75% de cristais na extração com éter. A análise cromatográfica em camada delgada demonstrou a presença de calicina, ácido pulvínico e sua lactona. Estes dados foram confirmados pelos estudos em CLAE que demonstraram a maior concentração do ácido pulvínico nos extratos etéreo, seguido pelo clorofórmico e sua ausência no extrato acetônico. Os testes de atividade citotóxica mostraram as concentrações inibitórias a 50% (IC50) de 3,75µg mL-1 e 17µg mL-1 para os extratos etéreo e clorofórmico, respectivamente, frente as células. Os ensaios de toxidez demonstraram que os extratos apresentaram ausência de toxidez, entretanto não foi possível se determinar a DL50, pois, até a concentração de 2000mg kg-1 não se verificou letalidade dos animais testados. O extrato etéreo apresentou relevante atividade antitumoral com uma redução do crescimento tumoral de 67% frente ao sarcoma 180 e de 56,4% frente ao carcinoma de Erhlich, em relação ao grupo xi controle. Os resultados dos ensaios com a técnica de AgNOR demonstraram que no caso do carcinoma de Erlich houve uma significativa inibição do ritmo mitótico e no Sarcoma 180 maior área de necrose tumoral. Em adição a isto, pode-se sugerir que o principal responsável pelas atividades observadas é o ácido pulvínico, encontrado em maior concentração no extrato mais ativo. O conjunto de dados obtidos foi bastante relevante uma vez que os extratos analisados apresentaram significativa atividade antineoplásica in vitro e in vivo e cujo mecanismo de ação parece estar relacionado com a inibição do processo mitótico e não somente a ação citotóxica propriamente dita.