Caracterização das células tricoleucêmicas por dimensão fractal

Abstract

As leucemias são um grupo doenças malignas do sangue, sem etiologia bem esclarecida, causadas pela proliferação anormal dos leucócitos ao nível dos órgãos hematopoiéticos com repercussão no sangue periférico, apresentando modificações qualitativas e quantitativas características. Dentro do centro produtor de células sanguíneas (medula óssea), uma célula imatura denominada de blastos, sofre uma ou mais mutações genéticas que a transformam em uma célula cancerosa, não funcionando adequadamente, multiplicando-se mais rápido com certa perda natural da capacidade de morrer. A tricoleucemia ou leucemia de células cabeludas (HCL) é uma doença linfoproliferativa crônica de curso indolente do qual apresenta uma tríade diagnóstica de pancitopenia, esplenomegalia e clones de linfócito B circulantes com projeções vilosas citoplasmáticas características. Atualmente, o diagnóstico é realizado por meio de um analista através de análises morfológicas, análise de mielograma, hemograma completo, esfregaço de sangue periférico, reações citoquímicas, perfil imunofenotípico, estudos citogenéticos (cariótipo), entre outras análises que possuem custo elevado. No entanto, diagnósticos através dos métodos computacionais morfométricos ainda são pouco utilizados, mais rápidos e com menor custo e podem ser aliados na identificação destas alterações celulares possibilitando um diagnóstico mais precoce, com menores taxas de erro, para um melhor sucesso do tratamento do paciente. Diante disso, o objetivo do presente projeto será estabelecer, através de um método de quantificação, as irregularidades de contorno de células leucêmicas (tricoleucemia), com base na sua geometria fractal, comparado ao contorno normal, como potencial ferramenta auxiliar ou complementar no diagnóstico diferencial deste tipo de leucemia, visando auxiliar profissionais na área de saúde no diagnóstico e prognóstico desse tipo de câncer. Para tanto, serão selecionadas 150 imagens de linfócitos tricoleucêmicos proveniente da leucemia de células pilosas (HCL) e 150 imagens de linfócitos normais, no aumento de 40X em um microscópio óptico (Nikon Eclipse E200, Tóquio, Japão), realizando a captura das imagens de um banco de dados, a fim de observar e quantificar variações citoplasmáticas características dos tricoleucócitos, através do método de quantificação morfométrica por geometria fractal. Será realizado manualmente o contorno das células sob a ferramenta retângulo ou círculo, e em seguida, as imagens serão colocadas em escala de cinza, binarizadas para dar destaque ao contorno da membrana plasmática, com o auxílio do programa “ImageJ”. Ainda no programa será calculado a dimensão fractal (DF) da membrana plasmática dos linfócitos leucêmicos e linfócitos normais pelo método de "Box-counting", tendo valores obtidos comparados, observando as variações e irregularidades de membrana apresentada pelas células leucêmicas em comparação as saudáveis. Para análise dos dados serão utilizados testes estatísticos. Com base nas medições de dimensão fractal de linfócitos normais e tricoleucêmicos, espera-se obter valores numéricos de dimensões que permitam caracterizar este tipo de leucemia, servindo como método auxiliar ou complementar ao diagnóstico.