Implantação de métodos de diagnóstico imunológico para Esquistossomose mansônica baseado em ELISA para detecção de imunoglobulinas (IgM e IgG) humanas

Abstract

No Brasil, esquistossomose é uma parasitose causada por trematódeos da espécie Schistosoma mansoni. O diagnóstico da doença é baseado, principalmente, no método parasitológico Kato-Katz, entretanto, a técnica apresenta sua sensibilidade reduzida em locais de baixa endemicidade. Sabendo disso, métodos de diagnósticos alternativos são necessários para detecção sensível de indivíduos infectados. Assim, o objetivo do estudo foi desenvolver métodos de diagnóstico para a esquistossomose mansônica baseado na detecção de anticorpos. Foi realizada a produção dos antígenos solúveis dos vermes adultos (SWAP), padronização do método de imunoabsorção enzimatica (ELISA) para detecção de IgM e IgG específicas contra SWAP,, realização do inquérito epidemiológico com indivíduos de área endêmica para validação do teste de ELISA e correlação dos níveis de imunoglobulinas com a carga parasitária, sexo e idade dos indivíduos. Na análise estatística, foi utilizado teste de Chi-quadrado e teste t não paramétrico Mann-Whitney. Foi obtido um concentrado antigênico de 440 μg/mL para uso nas reações. Durante a padronização, as melhores condições obtidas foram utilizando concentrações do antígeno de 10 μg/mL e diluição dos conjugados de 1:1.000. No inquérito, foram coletadas amostras de fezes de 2.028 indivíduos e amostras de sangue de 345 indivíduos, sendo 165 indivíduos positivos para infecção por de acordo com a microscopia. O ELISA para detecção de IgM obteve uma sensibilidade de 45% e a detecção de IgG de 72,12%. Foi observado interferência da idade apenas no grupo dos infectados (p = 0,0011). Não foi demonstrado relação entre carga parasitária e positividade no teste imunológico. O protocolo desenvolvido pode ser um candidato para utilização no diagnóstico de indivíduos de áreas endêmicas.