Aplicação do anticorpo monoclonal 2F12 na pesquisa de anti- NTPase em lágrimas de indivíduos portadores de toxoplasmose ocular em Recife- PE

Abstract

O Toxoplasma gondii é um importante agente de uveíte posterior nos indivíduos imunocompetentes levando a perda parcial ou total da visão, caracterizando assim, a forma ocular da toxoplasmose. Atualmente, o diagnóstico laboratorial desta forma da doença, não produz bons resultados, levando a inexistência de correlação entre os níveis de anticorpos circulantes e a sintomatologia ocular, sendo comum à ocorrência de títulos baixos. Para auxiliar o diagnóstico clínico e diferenciar a lesão toxoplásmica de lesões por outra etiologia, Asai et al. (1983) produziram um anticorpo monoclonal (AcMo-2F12), contra uma enzima citosólica, a NTPase, presente na forma ativa (taquizoíto) do T. gondii. Em camundongos infectados, a detecção desta enzima na circulação, foi capaz de identificar a fase ativa do parasito. O presente estudo se propôs a testar o AcMo-2F12, em lágrimas de indivíduos com toxoplasmose ocular clinicamente ativa, como uma possível ferramenta para o diagnóstico laboratorial diferencial da uveíte posterior por T.gondii.Como ferramenta de pesquisa, utilizamos o teste de dot blot em amostras de lágrimas de 21 pacientes com uveítes posterior ativa devido a infecção pelo T. gondi (UPAPT) com lesão padrão ouro (os pacientes apresentavam lesão satélite à lesão cicatrizada) e 20 indivíduos controles sem histórico nem lesões oculares sugestivas de toxoplasmose. Discos de nitrocelulose foram incubados com as lagrimas, bloqueados e incubados durante uma hora com o AcMo 2F12 a-NTPase, seguido de incubações com conjugados a-Ig total (a-Igt) de camundongo conjugado a biotina e avidina- Peroxidase. A sensibilidade do teste foi de 95,27%, especificidade 55%, valor preditivo positivo de 63,31% e valor preditivo negativo 90,48%. Obtivemos pelo teste de Fisher um valor de p=0,0005, considerado como significante todo valor de p<0,05 e odds ratio de 21,444 (considerando I.C. de 95%: 2, 726 a 219,21). Os resultados demonstraram forte associação entre a presença de NTPase na lágrima, detectada pelo AcMo 2F12 e a toxoplasmose ocular ativa