Modulações gênicas em Trichosporon asahii e Trichosporon inkin adaptados à condições urinárias simuladas

Abstract

A tricosporonose invasiva é uma infecção fúngica causada por Trichosporon spp., com o trato urinário sendo o principal local de envolvimento, especialmente em pacientes com cateteres de demora. Este estudo concentrou-se em duas das espécies urinárias mais prevalentes, Trichosporon asahii e Trichosporon inkin. Para elucidar os mecanismos adaptativos ao ambiente urinário, investigamos a expressão gênica associada ao metabolismo da ureia, captação de glicose e resposta ao estresse sob condições simuladas. Foram utilizadas as cepas de referência T. asahii CBS 2479 e T. inkin CBS 5585. Os genes-alvo com funções conservadas foram identificados em T. asahii com base em ortólogos descritos em Cryptococcus neoformans e, posteriormente, inferidos em T. inkin por meio das ferramentas OrthoFinder e BLASTn. Para simular condições urinárias, foram usados meios de urina artificial, representando urina hígida (H-UA), glicosúria (G-AU) e glicosúria com proteinúria (P-AU), baseados em concentrações descritas na literatura. As cepas foram cultivadas nesses meios e as curvas de crescimento monitoradas a cada 3 horas por 48 horas, utilizando suspensões celulares padronizadas e medição da densidade óptica a 600 nm. Para avaliação da expressão gênica, foi realizado qRT-PCR a partir de RNA extraído nas condições experimentais, com análise relativa de expressão normalizada pelo método 2 -ΔΔCt . Os resultados mostraram que T. asahii apresentou um aumento progressivo na expressão dos genes associados ao metabolismo da ureia (urease e ureG), enquanto T. inkin exibiu redução significativa de expressão em G-AU e P-AU, destacando diferenças no uso de nitrogênio entre as espécies. Em relação à captação de glicose, o gene do transportador de hexose apresentou maior expressão em T. asahii sob condições ricas em nutrientes, evidenciando sua adaptação ao ambiente urinário em cenários patológicos. Já o gene HOG1, relacionado à resposta ao estresse, mostrou redução de expressão exclusivamente em T. asahii sob G-AU, enquanto apresentou modulação positiva nos genes relacionados ao metabolismo de nitrogênio e carboidratos. Esses achados corroboram estudos que associam genes do metabolismo da ureia e captação de glicose ao sucesso da infecção fúngica, indicando que T. asahii possui maior expressão de genes relacionados à adaptação em ambientes urinários. Por outro lado, T. inkin demonstrou menor adaptação nas condições G-AU e P-AU, com maior expressão de genes ligados à resposta ao estresse ambiental na primeira condição.