Avaliação do perfil de expressão do gene siglec15 em osteossarcoma

Abstract

Apesar de ser considerado um câncer raro, o osteossarcoma (OS) é caracterizado por uma alta taxa de mortalidade e uma expectativa de vida geralmente baixa, comumente associada a um prognóstico desfavorável. Aproximadamente 40% dos pacientes com OS apresentam recidiva da doença e desenvolvimento de metástases em menos de três anos após o diagnóstico. Entre as complicações frequentes do OS, destaca-se a metástase pulmonar, que tem sido identificada como a principal causa de óbito nesses pacientes. Nesse contexto, a avaliação da expressão gênica no OS emerge como uma ferramenta importante , para oferecer insights valiosos para enfrentar esse desafio durante o tratamento quimioterápico. Diante disso, o objetivo do presente estudo foi avaliar a expressão do gene Siglec15 em osteossarcoma. Análises in silico nos bancos de dados String-db e OSE foram realizadas para avaliar as interações entre proteínas. A linhagem SAOS-2 foi cultivada e tratada com diferentes concentrações de cisplatina 1μM e 40μM, respectivamente. A extração do RNA total das células cultivadas foi realizada usando Trizol® (Invitrogen, UK) e a síntese de cDNA pelo high capacity cdna reverse transcription kit (Applied Biosystems). A expressão do gene Siglec15 no OS foi avaliada pela reação de polimerase em cadeia da transcrição reversa em tempo real (RT-qPCR), utilizando o método SYBR® Green com primers específicos. A análise dos dados gerados foi realizada utilizando o software GraphPad Prism 8, com valores de p<0,05 sendo considerados estatisticamente significativos. Os resultados mostraram que o Siglec15 apresenta uma rede de interação com dez proteínas, incluindo os Siglecs-1,4,7,8 e 11. As interações mais significativas envolveram a mineração de texto e uma interação de dados experimental, demonstrando experimentalmente se ligarem ou estarem no mesmo complexo proteico. No OSE foi possível observar uma relação entre a taxa de sobrevida global e livre de eventos com a expressão do Siglec15. Pacientes com maior expressão do gene apresentaram uma menor sobrevida. Em relação a expressão do Siglec15 na linhagem SAOS-2 tratada com cisplatina, não foi observada diferença significativa, no entanto não foi descartada a possibilidade da cisplatina modular a expressão do Siglec15, sendo necessários ensaios futuros realizados em triplicata e com outras linhagens de osteossarcoma para melhor compreensão.