Caracterização fenotipica e molecular em isolados clínicos de Enterococcus faecium e o efeito da vancomicina e da linezolida sobre o biofilme

Abstract

Os enterococos são bactérias gram-positivas distribuídas de forma ubíqua. Este grupo de microrganismos são comensais de humanos e animais que podem se comportar como patógenos oportunistas e causar graves infecções. São resistentes a diversas drogas, possui a capacidade de formar biofilme, fator responsável pela cronicidade das infecções. O presente estudo teve como objetivo caracterizar fenotípica e molecularmente isolados clínicos de Enterococcus faecium e verificar o efeito de dois fármacos (vancomicina e linezolida) sobre o biofilme. Para isso, foram utilizadas 15 isolados de E. faecium provenientes de diferentes sítios de infecção de pacientes internados em um hospital público da Região Metropolitana do Recife (RMR), Pernambuco, nordeste do Brasil. Estas bactérias foram caracterizadas fenotípica (sistema automatizado VITEK) e molecularmente (MALDI-TOF MS) para confirmação da sua identidade molecular. O perfil de resistência fenotípico também foi avaliado, bem como a análise molecular por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) direcionada aos respectivos genes (vanA, vanB, vanN, cfr, optrA e poxtA) de resistência. Adicionalmente, foi verificado o potencial dos isolados para formação de biofilme e o efeito da vancomicina e da linezolida sobre a matriz polimérica extracelular de E. faecium (14872) e do isolado UFPEDA 09 (controle). Os resultados revelaram que todos os isolados correspondem à espécie E. faecium, sendo estes resistentes à vancomicina e a maioria sensíveis à linezolidae formadores de biofilme. Concentrações Mínimas Inibitórias (CMI) da vancomicina e da linezolida não foram suficientes para impedir a formação do biofilme bacteriano. Concentrações a partir 2x CMI da vancomicina e da linezolida até 32x CMI de cada fármaco foram utilizadas para desestabilizar o biofilme formado. Os resultados aqui apresentados reforçam o elevado desafio do enfrentamento para tratamento de infecções causadas por esse patógeno e demonstram a necessidade de ações de monitoramento e vigilância nas unidades hospitalares como medidas preventivas, uma vez que para desestabilizar e/ou erradicar o biofilme deste patógeno são necessárias concentrações altas dos fármacos testados o que poderia gerar consequências de intoxicação para os pacientes.