Reversão da resistência bacteriana a ceftazidima em isolados de Klebsiella pneumoniae produtores da bomba de efluxo AcrAB-TolC após associação com menadiona, 4-terpineol e canfeno

Abstract

Nas últimas décadas, o uso irracional de antibióticos estimulou a resistência e a elevada disseminação de genes de resistência entre bactérias. Microrganismos patogênicos de alto risco para a saúde humana compõem o grupo denominado ESKAPE, tendo como um dos membros Klebsiella pneumoniae. Algumas cepas dessa bactéria expressam bombas de efluxo como um dos principais mecanismos de resistência. Nesse sentido, a terapia utilizando um inibidor de bombas de efluxo em associação a um antimicrobiano convencional é uma estratégia promissora para reverter quadros de resistência bacteriana. Neste sentido, destacam-se os terpenos, classe ampla de hidrocarbonetos produzidos por uma grande variedade de plantas que já tiveram diversas atividades farmacológicas comprovadas, e as vitaminas lipossolúveis, como a menadiona, reconhecida por seu papel essencial na coagulação sanguínea como potenciais inibidores de bomba de efluxo. Assim, este trabalho teve como objetivo analisar o potencial da menadiona, do 4-terpineol e do canfeno como agentes inibidores de bomba de efluxo em isolados de K. pneumoniae resistentes a ceftazidima (CAZ). Inicialmente, através da PCR, foi realizada a identificação dos isolados portadores do gene acrB, os quais são capazes de utilizar o complexo AcrAB-TolC para expulsar fármacos. Em seguida, foi determinada a Concentração Inibitória Mínima (CIM) da CAZ frente aos isolados para verificar o seu perfil de resistência. Posteriormente, foi realizada a determinação da CIM da CAZ combinada com cada um dos compostos na concentração subinibitória (CIM/2). Cinco isolados coletados apresentaram resultados positivos para a presença do gene acrB. A CIM da CAZ para os cinco isolados variou entre 16 e 512 µg/mL indicando resistência a CAZ (CIM ≥16 µg/mL para Enterobacteriales) de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Na combinação de CAZ com a menadiona ou terpenos foi observada a redução da CIM de CAZ de 4 a 8 vezes, com novos valores de CIM variando de 1 a 4 µg/mL para quatro dos cinco isolados testados, induzindo-os a susceptibilidade a CAZ após a combinação. Assim, a associação de CAZ à menadiona e aos terpenos demonstrou potencial inibitório sobre os sistemas de efluxo bacteriano, se apresentando como agentes que podem ser úteis como uma abordagem alternativa para melhorar a eficácia clínica de antibióticos.