Estudo sobre atividade antimicrobiana in vitro de cladina dendroides, líquen

Abstract

O líquen é formado por uma associação simbiótica entre fungo e alga. Esses organismos produzem substâncias resultantes de rotas secundárias, denominadas substâncias liquênicas. Compostos obtidos de líquens são importantes em atividades farmacológicas tais como antiviral, antibiótica, antifúngica e antimicrobiana. No presente trabalho foi estudada a atividade antimicrobiana de extrato de Cladina dendroides. Para obtenção dos extratos orgânicos, o material liquênico de peso (10,65g) previamente limpo e seco foi macerado e acondicionado em erlenmeyer. A este, adicionou-se 100 mL de éter dietílico, seguindo-se agitação por 10 min., sendo posteriormente mantido a 6°C por 24h. Após esse tempo, a mistura foi filtrada em papel de filtro e o extrato etéreo obtido foi mantido à temperatura ambiente (28±3ºC). Acrescentou-se ao resíduo liquênico 100 mL de clorofórmio sob as mesmas condições da extração anterior. Após 24h o processo foi repetido com acetona. Os extratos foram evaporados à temperatura ambiente, em seguida mantidos em dessecador até a obtenção de peso constante. A análise da composição fenólica dos extratos orgânicos foi efetuada através de Cromatografia em Camada Delgada. A atividade antimicrobiana in vitro foi realizada por meio do método de difusão em meio sólido utilizando-se discos de papel (Bauer et al., 1966) e o método de diluição em caldo. As bactérias utilizadas nos testes foram Acinetobacter baumannii (ATCC-19606), Escherichia coli (ATCC-25922)i, Salmonella typhimurium (ATCC-14028, Shigela flexneri (ATCC-12022), Enterobacter cloacae (ATCC-13047), Enterococcus faecalis (ATCC-29212), MRSA (Staphylococcus aureus resistente a meticilina) (cepa clínica), Streptococcus pyogenes (cepa clinica), Staphylococcus aureus (ATCC-29213) e Kocuria rhizophila (ATCC-93041). As placas foram incubadas a 37ºC por 24h. Foi utilizado como padrão o antibiótico cloranfenicol. Os resultados foram avaliados através da mensuração do halo de inibição ao redor dos discos e expressos em milímetros, comparados com do padrão, cloranfenicol. Os resultados mostraram eficientes sendo o melhor rendimento obtido com o extrato etéreo (1,023%) seguido por clorofórmico (0,084%) e acetônico (0,075%). A análise cromatográfica dos extratos apresentou um padrão de bandas distinto para os três extratos, sendo observada a presença do ácido barbático (Rf 0,57) nos extratos etéreo e clorofórmico. Foram observados ainda três bandas não identificadas, duas no extrato clorofórmico (Rfs 0,71 e 0,78) e uma banda no extrato acetônico (Rf 0,14). O extrato etéreo apresentou-se ativo frente a bactéria A. baumannii com um halo de 10 mm de inibição pelo método do disco e ativo contra Salmonella com concentração inbitória de 0,078 mg/mL, MRSA ferida com 0,009 mg/mL e S. aureus 0,16 mg/mL pelo método de diluição em caldo. O extrato etéreo demonstrou relevante potencial antimicrobiano. Uma vez que é constituído por ácido barbártico é possível que este composto seja o responsável pela ação antimicrobiana observada.