Atividade antibiofilme dos óleos essenciais de Melaleuca alternifolia e Mentha piperita frente Aeromonas spp. isoladas do peixe amazônico Tambaqui (Colossoma macropomum).

Abstract

O Tambaqui (Colossoma macropomum) é um peixe onívoro da Bacia Amazônica e é o segundo peixe mais cultivado no Brasil. O manejo inadequado dos espécimes, na piscicultura, pode ocasionar estresse aos peixes, agravando mais a saúde desses animais enfermos, que muitas vezes já estão bastante debilitados pela ação dos parasitos e patógenos Os Tambaquis, que passam por estresse em cativeiros, ficam suscetíveis a bactérias aquáticas, como Aeromonas, que se fixam nos tecidos do peixe, podendo formar biofilme, resultando na morte do peixe. Além disso, o uso de medicamentos, como os antibióticos, de forma exacerbada, pode impactar negativamente o meio ambiente contaminando as águas dos rios. Por isso, faz-se necessário, então, buscar novas abordagens terapêuticas para os tambaquis criados em cativeiros. Os óleos essenciais de Melaleuca alternifolia e Mentha piperita, derivados de plantas, possuem propriedades antimicrobianas devido a compostos presentes como terpenos e esteróides. Este projeto teve como objetivo avaliar a capacidade de formação de biofilme, como característica de virulência das cepas de Aeromonas spp. previamente isoladas do Tambaqui e a atividade antibiofilme dos óleos essenciais de Melaleuca alternifolia e Mentha piperita. 4 cepas de Aeromonas hydrophila, 1 de Aeromonas veronii, 3 de Aeromonas caviae e 2 de Aeromonas dhakensis, anteriormente preservadas em óleo mineral, foram reativadas em caldo BHI e preservadas em Ágar Nutriente. Para avaliação dos biofilmes, foram usadas placas para cultura de células de 96 poços. Foi feita a diluição das colônias em BHI, padronização de células no espectrofotômetro e distribuição nas placas. Para o ensaio antibiofilme uma suspensão das cepas a 10⁶ foi distribuída em triplicatas juntamente com 10ul de cada óleo essencial e 150ul de caldo Muller Hinton. Foi usado Tween 80 a 1% como diluente dos óleos e o teste foi feito a partir do CMI dos mesmos por meio de diluição seriada. Em ambos os testes, após 24h em estufa, foram feitas as lavagens das placas, fixação dos poços e coloração. Após o ensaio de Elisa a 570nm as cepas foram classificadas, de acordo com a capacidade de aderência. A cepa de A. veronii e 1 das cepas de A. caviae não apresentaram aderência. As demais cepas de A. dhakensis, A. caviae e A. hydrophila foram classificadas como “fracamente aderente”, 2 das 4 cepas de A. hydrophila se classificaram como “moderadamente aderente”. Os óleos essenciais de Melaleuca alternifolia e Mentha piperita apresentaram atividade antibiofilme. O óleo de Melaleuca alternifolia teve uma melhor atividade sobre as cepas de A. dhakensis tendo 78% de inibição em uma das cepas. O óleo de Mentha piperita mostrou uma boa atividade sobre as cepas de A. caviae e teve atividade em todas as cepas. Em suma, os óleos essenciais apresentaram resultados satisfatórios de inibição das cepas, porém estudos são necessários para entender a relação dos óleos com a inibição dos biofilmes. Testes bioquímicos, genéticos e microscopia podem ajudar na visualização da estrutura da bactéria e os danos causados ao biofilme.