Caracterização polifásica como ferramenta de validação de isolados de leveduras de importância médica do gênero Candida

Abstract

As leveduras do gênero Candida fazem parte da microbiota humana colonizando o trato gastrintestinal e geniturinário. Quando ocorrem desequilíbrios na microbiota do hospedeiro, seja de ordem imunológica ou física, o fungo se propaga causando a candidemia. O presente trabalho objetivou revalidar isolados de leveduras da Coleção de Cultura da Micoteca URM, da Universidade Federal de Pernambuco através da taxonomia polifásica. Foram utilizados três métodos para identificação das espécies, através do meio presuntivo cromogênico, com o uso do CHROMAgar™ Candida, onde as colônias produzem colorações típicas para cada espécie através de reações enzimáticas com a hidrólise de hexosaminases. Também através de uso do VITEK 2 COMPACT, que utiliza um sistema automatizado com base em métodos fenotípicos de assimilação para a identificação de espécies de leveduras, e pela identificação genômica através da extração e sequenciamento da região 28S do rDNA fúngico. Os 21 isolados de leveduras obtidos na Micoteca URM da UFPE foram identificadas como pertencentes às espécies Candida albicans (9), C. tropicalis (7), C. parapsilosis (4) e C. krusei (1). Espécies de Candida crescidas em meio cromogênico CHROMAgar™ Candida podem apresentar alterações nas colorações espécie-específica indicadas pela fabricante, isso causado pela produção de enzimas similares entre diferentes espécies de Candida. O uso do VITEK 2 COMPACT® como método de identificação de isolados de Candida não-C. albicans pode imprimir resultados discrepantes em relação ao padrão ouro, uma vez que se utiliza de uma identificação fenotípica baseada na assimilação de testes bioquímicos fluorescentes. A Identificação genômica, embora mais sensível e específica, é mais custosa em relação às demais plataformas de uso laboratorial aqui elucidadas. Além de requerer maior expertise técnica em sua manipulação. Conclui-se, então, que alternativas como o uso de meios de cultura presuntivos, técnicas de automação, assim como técnicas genômicas podem auxiliar na identificação de isolados fúngicos, uma vez que, sejam utilizados como vias de complemento.