Metabonômica aplicada à avaliação da qualidade do fluido seminal : identificação de infertilidade associada à varicocele & prognóstico de melhora dos padrões seminais pós- varicocelectomia e impacto no sucesso gestacional

Abstract

É estimado que aproximadamente 15% dos casais, em idade reprodutiva, tenham um diagnóstico de infertilidade. Os fatores masculinos respondem por 40% a 50% desses casos. A varicocele é uma condição que pode estar relacionada com os casos de infertilidade masculina, sendo prevalente em 12% dos indivíduos e acomete aproximadamente 25% dos homens inférteis. O presente trabalho teve por finalidade a construção de modelos metabonômicos baseados nos dados espectrais de RMN de 1H obtidos de soro de sêmen para o diagnóstico da varicocele e da infertilidade associada a dilatação das veias que drenam o sangue testicular. Além disso, foram elaborados modelos metabonômicos com fins de prognósticos da melhoria da qualidade do sêmen após a varicocelectomia. Para fins didáticos, separamos o trabalho em quatro estudos: no primeiro, avaliamos a discriminação entre os pacientes com varicocele dos pacientes saudáveis; no segundo, buscamos discriminar infertilidade associada à varicocele; no terceiro estudo procuramos prever quais pacientes teriam melhora dos parâmetros seminais pós-varicocelectomia; e, no quarto estudo, foram elaborados modelos metabolômicos para identificar quais os voluntários com varicocele e infertilidade teriam aumentadas as chances de gestação após o reparo da mesma. A primeira e segunda parte do estudo foram realizadas com 80 voluntários, sendo 24 do grupo controle, 21 do grupo Varicocele Fértil e 35 do grupo Varicocele Infértil. Enquanto as duas últimas etapas, foram executadas com amostras de 43 voluntários que foram submetidos à varicocelectomia, visando aumentar as chances de gravidez. Foram obtidos espectros de RMN de 1H e os dados espectrais foram tratados usando a plataforma online MetaboAnalyst e os softwares Matlab, Statistica e Excel. Os modelos foram criados usando os formalismos PLS-DA, OPLS-DA e LDA. Nos Estudos I e II, o formalismo GA-LDA foi o que apresentou melhores resultados. No primeiro, foram observados valores de exatidão, sensibilidade e especificidade iguais a 95,8%, 100% e 85,7%, respectivamente, para o diagnóstico de varicocele. No estudo II, foram encontrados valores de exatidão, sensibilidade e especificidade iguais a 94,1%, 100% e 83,3%, respectivamente, para o diagnóstico diferencial de infertilidade associada à varicocele. Nos Estudos III e IV, os melhores resultados foram obtidos com o formalismo LDA. No Estudo III, os valores de exatidão, sensibilidade e especificidade são iguais a 93,1%, 94,4% e 90,9%, respectivamente, para prognóstico de melhora da qualidade do sêmen. E no Estudo IV, o modelo conseguiu discriminar, as amostras de voluntários que relataram gravidez em até 24 meses após varicocelectomia com a extadião de 95,6% na validação cruzada. Os achados deste trabalho de tese confirmam a hipótese admitida de que condições clínicas como infertilidade e varicocele, bem como a intervenção cirúrgica, alteram o perfil de metabólitos endógenos contidos no fluido seminal, permitindo a construção de modelos metabonômicos capazes de predizer os casos em que a varicocelectomia pode melhorar as chances de gravidez para pacientes com infertilidade associada à varicocele.