Caracterização genética e bioquímica de isolados de Acinetobacter baumannii e Pseudomonas aeruginosa multidroga-resistente (MDR) e extensivamente-resistente (XDR) obtidos de dois hospitais públicos do Recife-Pernambuco, Brasil

Abstract

A evolução de bactérias cada vez mais resistentes decorre de múltiplos fatores, que incluem o uso generalizado e por muitas vezes, inadequado de antimicrobianos. Acinetobacter baumannii e Pseudomonas aeruginosa são espécies de natureza ubíqua que possuem suscetibilidade diminuída a condições ambientais adversas como a dessecação, soluções desinfetantes, antissépticas e variações de temperatura, o que contribui para o seu potencial de transmissibilidade em ambientes hospitalares. O objetivo do presente trabalho foi investigar a ocorrência de β–lactamases em isolados de A. baumannii e P. aeruginosa obtidos de dois hospitais públicos em Recife-PE, além de verificar sua capacidade para formação de biofilmes. A identificação de 100 isolados (35 de A. baumanii e 65 de P. aeruginosa) foi realizada pelo método automatizado Vitek®2 Compact (bioMérieux) e confirmada pela técnica MALDi-TOF-MS. Foram realizados experimentos moleculares por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para detecção dos genes blaKPC blaIMP, blaVIM e blaSHV. Amostras de fragmentos amplificados foram purificadas e seqüenciadas para confirmação da identidade gênica. Foi avaliado, também, o potencial de formação de biofilme em diferentes meios de cultura: Luria Bertani Miller (LB Miller), Tryptose Soy Broth (TSB) ambos suplementados, ou não, com 1% de glicose (25%) pelo método Cristal Violeta. Como resultado, a identidade fenotípica dos isolados bacterianos foi confirmada pelo método MALDI-TOF-MS, demonstrando assim, a eficiência das técnicas utilizadas. Os isolados apresentaram perfis de resistência/suscetibilidade distintos, porém o maior índice de resistência para ambas as espécies foi detectado para o gene blaKPC, seguido do blaSHV, blaVIM e blaIMP. O gene blaKPC apresentou positividade em 60 isolados (54.28% de A. baumanii e 63.07% de P. aeruginosa) enquanto que o gene blaSHV em 39 (22.85% de A. baumanii e 38.46% de P. aeruginosa). O blaIMP foi detectado em apenas um isolado de A. baumannii (2.85%) e o blaVIM, em oito (2.8% em A. baumanii e 7.69% em P. aeruginosa). Foi possível verificar a disseminação de bactérias Multidroga-Resistentes (MDR) e Extensivamente-Resistentes (XDR) em diferentes setores dos hospitais investigados. Todos os isolados foram sensíveis a polimixina, sendo essa a única opção terapêutica. Esses dados são alarmantes e indicam a elevada e crescente capacidade de adaptação destas espécies no ambiente hospitalar, demonstrando o aspecto problemático do tratamento e erradicação desses micro-organismos. Todos os isolados formaram biofilme nos meios testados, porém com diferentes intensidades. Não foi possível correlacionar o perfil de resistência com a capacidade de formação de biofilmes. Nas duas espécies investigadas, os isolados XDR, MDR e N- MDR foram encontrados como formadores fortes, moderados e fracos. A elevada diversidade de perfis microbianos de A. baumanii e P. aeruginosa, observada nesse estudo, demonstra a dificuldade na escolha eficaz do tratamento para essas espécies e revela a necessidade de monitoramento contínuo, com vigilância epidemiológica destas infecções no ambiente hospitalar.