Análise funcional do polimorfismo rs2306969 (-6951C>T) na região regulatória do gene codificador da α1,3/4-Fucosiltransferase humana associada ao carcinoma invasivo de mama

Abstract

Glicanos fucosilados sintetizados pela α1,3/4-fucosiltransferase (FUT3) desempenham papéis importantes nos processos de metástase e vigilância imunológica no câncer. Estudo realizado em pacientes com câncer de mama invasivo mostrou que FUT3 está reduzida em tumores mamários quando comparados a tecidos normais. A análise da região promotora do gene codificador da FUT3 revelou que o alelo minoritário T no polimorfismo rs2306969 (-6951C>T) está associado à presença da doença, mas a sua influência na expressão da proteína é desconhecida. O objetivo deste trabalho foi avaliar o impacto do polimorfismo rs2306969 (-6951C>T) na transcrição e expressão proteica da α1,3/4-fucosiltransferase em paciente com carcinomas invasivos de mama e investigar as possíveis consequências dos diferentes níveis desta enzima sobre características fenotípicas tumorais em diferentes populações. A possível influência dos diferentes genótipos do polimorfismo rs2306969 sobre a expressão proteica em células tumorais mamárias foi avaliada in vitro através do ensaio do gene repórter Luciferase e ex vivo pela análise das expressões gênica e proteica de FUT3 em 29 tumores mamários invasivos. Ambos os sistemas demonstraram que o polimorfismo rs2306969 não modifica significativamente a expressão de FUT3. Após a análise da relação entre a expressão tumoral desta enzima e as características histopatológicas da doença em 47 pacientes brasileiras, a expressão de FUT3 se mostrou maior em pacientes diagnosticados antes dos 50 anos e naqueles que não apresentaram invasão vascular. Adicionalmente, dados clínicos e de expressão gênica de duas coortes independentes de pacientes com câncer de mama (METABRIC, 1904 pacientes; TCGA, 816 pacientes) foram obtidos e esta mesma análise foi realizada. Para a coorte METABRIC, os níveis de FUT3 se mostraram elevados em pacientes jovens (idade < 50 anos) e em tumores com maior grau histológico. Já para a coorte TCGA, a expressão de FUT3 foi maior em pacientes com estágios tumorais I e II e que não apresentaram envolvimento linfonodal. Em ambas as coortes os tumores positivos para os receptores de estrógeno e progesterona apresentaram menores níveis de FUT3. Já os tumores positivos para HER-2 apresentaram maior expressão deste gene. Análises uni- e multivariadas mostraram que a expressão elevada do FUT3 está consistentemente relacionada à menor sobrevida global dos pacientes quem compõem a coorte TCGA e o subgrupo de pacientes triplo-negativos da população METABRIC. Estes dados apontam para o uso potencial do FUT3 como biomarcador prognóstico nesta doença.