Seleção e avaliação de bactérias do gênero Bacillus com potencial probiótico para uso na carcinicultura

Abstract

O sistema sustentável de cultivo moderno se baseia no estímulo da produção natural, traduzida em bioflocos ou aglomerados microbianos que se formam na água, e no controle microbiológico pela adição à dieta ou diretamente na água de bactérias probióticas. Bactérias do gênero Bacillus são as mais empregadas para este propósito na carcinicultura e se destacam pela elevada produção enzimática de poder inibitório a outros microrganismos, pela capacidade de competição por nutrientes e área de adesão, pela participação nos estímulos imunes e pela contribuição no aumento do balanço microbiano intestinal através da permanência nesta região. Na presente tese, os resultados obtidos foram apresentados em três capítulos: no primeiro, o camarão marinho Litopenaeus vannamei foi cultivado em sistema de bioflocos e foi avaliado o efeito da adição de diferentes concentrações de fonte de carbono para atingir quatro relações C:N distintas (15:1, 20:1, 25:1 e 30:1) na qualidade da água de cultivo, desempenho do animal e nas concentrações de bactérias heterotróficas, quimioautotróficas e de bactérias do gênero Vibrio; deste estudo, foram tomados camarões saudáveis para o isolamento de bactérias presentes no hepatopâncreas e estômago para seleção in vitro de possíveis bactérias probióticas a serem usadas no segundo capítulo. No segundo capítulo, a caracterização morfo-fisiológica, bioquímica e molecular destas cepas selecionadas foi realizada e a avaliação através de excreção das enzimas digestivas protease, amilase e lipase, da atividade antagônica contra Vibrio parahaemolyticus, V.alginolyticus, V. mimicus e Pseudomonas aeruginosa e da formação de biofilme. No terceiro capítulo, duas cepas (IPA 58 e IPA 239) que se mostraram efetivas para as atividades enzimáticas e antagônicas aos patógenos selecionados no segundo capítulo foram ofertadas para pós-larvas de Macrobrachium rosenbergii durante cultivo experimental por 30 dias, sendo avaliada a capacidade de modificação da microbiota de hepatopâncreas e intestino do animal, pela quantificação de bactérias totais, Bacillus spp. e Vibrios spp. De uma coleção heterogênea isolada de 107 isolados bacterianos do hepatopâncreas e estômago de Litopenaues vannamei, apenas 20 foram positivos para as atividades de enzimas digestivas que funcionou como teste de seleção inicial e foram identificadas bactérias dos gêneros Bacillus e Shewanella. As cepas Bacillus amyloliquefaciens IPA 24, B. subtilis IPA 56, Bacillus sp. IPA 58, B. pumilus IPA 122 e B. amyloliquefaciens IPA 239 competem por substrato e produzem biofilme, apesar de apresentarem baixo padrão de sinergismo. Durante o experimento, IPA 58 manteve a característica de modificar a microbiota do camarão e ser mais eficiente na aderência tanto do hepatopâncreas quanto do intestino, compatibilizando com os resultados de produção de biofilme; IPA 239 atuou como biocontrole, minimizando a presença de víbrios na água e no animal, foi eficiente na melhoria dos parâmetros de desempenho de PL de M. rosenbergii, além de ser uma espécie recente como probiótico na carcinicultura. Por fim, as cepas de Bacillus sp. IPA 58 e Bacillus amyloliquefaciens IPA 239 podem ser utilizadas como probiótico em cultivo de PL de M. rosenbergii pela modificação e permanência na microbiota do hepatopâncreas e intestino do camarão no período avaliado, e promoção do crescimento do animal.