Determinação da troponina T cardíaca humana empregando sistema de microbalança de quartzo por injeção de fluxo

Abstract

As determinações da troponina cardíaca T (TnT) podem contribuir para o diagnóstico e tratamento de infarto agudo do miocárdio e para a estratificação dos riscos dos pacientes com síndromes coronárias agudas no que respeita ao risco relativo de mortalidade. Neste trabalho, um sistema de microbalança de quartzo por injeção de fluxo baseado na alteração de freqüência elétrica em resposta à ligação antígeno-anticorpo foi empregado para determinação da TnT cardíaca. As variações de freqüências foram registradas por um contador de freqüência acoplado a um microcomputador. O anticorpo monoclonal específico foi imobilizado sobre a superfície de um eletrodo de cristal de quartzo por ligação irreversível via monocamadas auto-organizadas. O adsorbato composto por filme de alcanotiól foi formado incubando uma solução de 2-aminoetanotiol (cisteamina) por 2 h, seguido por glutaraldeído a 2,5% (v/v). Em seguida, anticorpos monoclonais anti- troponina T (anti-TnT) foram covalentemente imobilizados sobre o eletrodo de ouro do cristal de quartzo e foi usada uma solução de glicina (10mM) como agente bloqueante. Com o imunossensor desenvolvido foi possivel medir concentrações de troponina T com limite de detecção de 0,025 ng/mL. A superfície do sensor pode ser regenerada por injeção de uma solução do dodecil-sulfato de sódio 1% (p/v). A determinação da TnT foi realizada em amostras de soros humanos permitindo seu uso nas aplicações clínicas para diagnóstico do IAM