Utilização de ondas sônicas e ultra-sônicas para obtenção de DNA em amostras de músculo humano

Abstract

A obtenção de DNA com finalidades forenses pode ser dividida em duas etapas, a digestão ou lise da amostra, liberando as moléculas de DNA na solução, e a purificação, que torna o DNA acessível às outras etapas do processo. Os métodos de lise celular em uso corrente na rotina laboratorial forense incluem variações de temperatura e uso de substâncias químicas como proteinase K, detergentes e agentes redutores em um processo bastante demorado e de alto custo. Neste trabalho, dois novos métodos de obtenção de DNA de músculo humano utilizando sondas sônicas (8 KHz) e ultra-sônicas (24 KHz) foram desenvolvidos. Empregando ondas sônicas é possível realizar a lise completa de amostras de músculo em tampão Tris-HCl 10 mM, pH 8.0 contendo 2% de SDS em apenas dois minutos. Utilizando ondas ultra-sônicas é possível a obtenção de DNA em água Milli- Q em dois minutos e sem a necessidade de etapas posteriores de purificação. Ambos os métodos resultaram em quantidades suficientes de DNA para identificação humana em ciência forense, entretanto, as amostras sonicadas resultaram em quantidades de DNA significativamente maiores que as obtidas das amostras submetidas ao ultra-som